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Reconnaissance antigénique
 Figure. Structure schématique d'une immunoglobuline, l'IgG. La réponse humorale du système immunitaire assure la protection contre les agents pathogènes (virus, bactéries et parasites) en produisant un large répertoire d'anticorps, capables d'interagir avec les antigènes présentés par ces micro-organismes. Cette capacité à reconnaitre des antigènes variés résulte de la présence de séquences d'acides aminés hyper-variables au niveau des sites de reconnaissance antigéniques des anticorps provenant de différents clones de lymphocytes B. Afin de comprendre la reconnaissance antigènique d'un point de vue structural, et d'identifier quels sont les facteurs qui sont importants pour la réponse immunitaire, nous avons entrepris des études cristallographiques et immunochimiques des anticorps induits par les antigènes provenant de différents agents infectieux.
La maladie de Chagas
et l'auto-immunité : Etude structurale d'un anticorps spécifique
d'une protéine ribosomale de Trypanosoma cruzi.
(En collaboration avec le Dr. Mireille Hontebeyrie, Unité de Repliement et Modélisation des Protéines, Institut Pasteur) La maladie de Chagas, dont l'agent étiologique est le protozoaire Trypanosoma cruzi, est une maladie tropicale qui affecte la plupart des pays d'Amérique Latine. Des anticorps induits par la protéine ribosomale P2b de T. cruzi semblent être associés à la cardiomyopathie chronique observée au cours de la maladie de Chagas. Cette pathologie serait liée à la présence d'anticorps spécifiques à la région C-terminale de la protéine P2b du parasite pouvant interagir avec les peptides dérivés de la deuxième boucle du récepteur b1-adrénergique humain présent sur les cardiomyocytes. Notre objectif est d'étudier la structure de ces anticorps et leurs interactions avec la protéine P2b et des peptides mimétiques du récepteur b1-adrénergique afin de comprendre la réactivité croisée de ces anticorps au niveau structural et son implication pour une réponse auto-immune dans la maladie de Chagas. Nous disposons d'un anticorps monoclonal, 17.2, spécifique de la région C-terminale de la protéine P2b, ainsi que de cette dernière sous forme de protéine recombinante. L'anticorps 17.2 présente in vitro un chronotropisme positif sur les cardiocytes via la reconnaissance d'un épitope situé sur la seconde boucle externe du récepteur b1 adrénergique. Ce système pourrait permettre de valider l'hypothèse d'une réponse auto-immune dans la maladie de Chagas.Nous avons déterminé la structure crystalline du fragment Fab de 17.2 sous forme de complexe avec la protéine ribosomale, P2b, ainsi que sous forme de complexe avec le fragment peptidique R9 portant l'épitope de cette meme protéine.
Etudes des Déterminants Antigéniques
du Virus de l'Hépatite BNous étudions la région préS de l'antigène de surface du virus de l'hépatite B (VHB). Elle est fortement impliquée au cours de la réponse immunitaire contre le virus, conduisant à la production d'anticorps neutralisants, et elle porte le site de reconnaissance de l'hépatocyte, cellule cible du pathogène. La définition de la conformation de cet antigène viral et la distribution spatiale de ses épitopes devraient améliorer nos connaissances sur le VHB et sur le mécanisme de la protection immunitaire conférée par les anticorps neutralisants. Nos recherches sont centrées sur des études structurales et immunochimiques de la région preS et de ses interactions avec des anticorps spécifiques afin de caractériser ses propriétés antigéniques. Structural and functional characterization
of a monoclonal antibody specific for the preS1 region of hepatitis
B virus. Structure of the Fab fragment
from F124, a monoclonal antibody specific for hepatitis B surface
antigen. Crystal structure of a dominant
B-cell epitope from the preS2 region of hepatitus B virus in the
form of an uinserted peptide segment in maltodextrin-binding protein.
Sequence analysis of a monoclonal
antibody specific for the preS2 region of hepatitis B surface antigen,
and the cloning, expression and characterisation of its single-chain
Fv construction. Maltodextrin-binding protein
hybrids carrying epitopes from the preS2 region of hepatitis B virus:
expression, antibody-binding and preliminary crystallographic studies. Crystal structure of a recombinant
form of the maltodextrin-binding protein carrying an inserted sequence
of a B-cell epitope from the preS2 region of hepatitis B virus.
Inhibition de la Protéase
du VIH par les Anticorps Monoclonaux
(En collaboration avec le Dr.
Juraj Sedlacek, Institute of Molecular Genetics, Academy of Sciences
of the Czech Republic, Prague.) La protéase du virus de l'immunodéficience
humaine (VIH) est essentielle pour la maturation et, par conséquent,
pour l'infectivité du virus en raison de son rôle dans
le clivage enzymatique des précurseurs polyprotéiques
viraux, produits par les gènes Gag et Pol. L'objet de ce
projet est d'étudier des anticorps monoclonaux anti-protéase
de VIH, inhibiteurs de l'activité enzymatique, afin d'analyser
le comportement dynamique de l'enzyme. Nos études portent
sur l'anticorps 1696 qui inhibe la protéase par dissociation
de l'enzyme virale en sa forme monomérique inactive et par
sa fixation à sa région N-terminale. Nous avons résolu
la structure cristalline du fragment Fv recombinant de l'anticorps
monoclonal 1696 sous forme de complexe avec un segment N-terminal
des protéases des VIH-1 et VIH-2. 
Crystal structure of a cross-reaction complex between an anti-HIV-1 protease antibody and an HIV-2 protease peptide. Structure of a single-chain Fv
fragment of an antibody that inhibits the HIV-1 and HIV-2 proteases. Inhibition of HIV protease by
monoclonal antibodies. Structural basis of HIV-1 and
HIV-2 protease inhibition by a monoclonal antibody. Inhibition of the HIV-1 and HIV-2
proteases by a monoclonal antibody. Structural studies of HIV-1 protease-inhibiting
antibodies. Three-dimensional structure of
an Fab-peptide complex: structural basis of HIV-1 protease inhibition
by a monoclonal antibody.
La
structure d'un Superantigène activant des Lymphocytes T en
présence des Molécules du CMH de Classe I et II.
(En collaboration avec le Dr.
Paulo Truffa-Bachi, Institut Pasteur) L'agglutinine de la Grande Ortie (Urtica Dioica Agglutinin, ou UDA), une lectine présente dans les rhizomes de l'ortie, se comporte comme un superantigène en activant la sous-famille de lymphocytes T murins portant le segment Vb-8.3 dans leur récepteur antigénique. Contrairement aux superantigènes " classiques " qui activent des lymphocytes T lors de leur présentation par les molécules du Complexe Majeur d'histocompatibilité (CMH) de classe II uniquement, l'UDA induit la stimulation des lymphocytes T lors de leur présentation par les CMH de classe I et II. La structure de l'UDA sous forme libre et sous forme de complexe avec le tri-acétylchitotriose ou le tetra-acétylchitotetraose a été déterminée. L'UDA comporte deux domaines, chacun portant un site de liaison saccharidique. Cette observation suggère que la propriété superantigénique de l'UDA est due à la fixation simultanée des régions saccharidiques de la molécule CMH et du récepteur des lymphocytes T. Crystal structure of Urtica dioica
agglutinin, a superantigen presented by MHC molecules of class I
and class II.
Institut Pasteur - 25, Rue du Docteur Roux - 75724 Paris Cedex 15 - FRANCE |
La maladie de Chagas et l'auto-immunité
: Etude structurale d'un anticorps spécifique d'une protéine
ribosomale de Trypanosoma cruzi
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