Hématopoïèse dans la rate fœtale chez la souris (R. Golub)

Présente chez tous les vertébrés, la rate est un organe asymétrique situé dans la partie postérieure de l’estomac en contact direct avec l’omentum et le pancréas. L’ébauche splénique a été décrite comme une condensation du mésenchyme dans le mésogastrium dorsal. Considéré comme un dérivé uniquement mésodermique, la rate possède un développement précoce difficile à étudier car aucun marqueur spécifique n’est connu. Chez l’adulte, la rate est un organe lymphoïde secondaire avec une architecture complexe en corrélation avec des fonctions précises lors des réponses immunitaires innées et adaptatives. La complexité de la rate adulte s’élabore par étapes clés tout au long de l’organogenèse : l’acquisition de capacités hématopoïétiques au cours de la vie fœtale, suivie par la régionalisation pendant la période néonatale.

Nos travaux portent sur les processus d’hématopoïèse, et les liens entre l’hématopoïèse et l’organogenèse de la rate chez la souris. Nous avons développé plusieurs outils et méthodologies. Entre autres, la culture organotypique de rates fœtales a permis des études d’hématopoïèse « in situ », et des reconstitutions hématopoïétiques en conditions congéniques. Des lignées de cellules stromales de rate fœtale au stade E15,5 ont également été caracterisées.

Nous avons démontré que dès les stades les plus précoces (E13), la rate fœtale contenait des CSH qui possèdent les mêmes capacités de reconstitution à long terme que celles isolées du foie fœtal. Cependant, dans cet environnement les CSH ne sont plus capables de s’expandre et se différencient toutes très rapidement, contrairement à ce que l’on observe dans le foie fœtal ou la mœlle osseuse néonatale. Nous avons démontré que l’environnement de la rate fœtale était entièrement dédié à l’engagement et la différenciation des CSH en cellules myéloïdes. Après une semaine de culture sur du stroma de rate fœtale, toutes les cellules obtenues sont des macrophages qui possèdent le phénotype F4/80+ Mac1+. La prolifération des précurseurs myéloïdes est très fortement stimulée par les cellules stromales. Nous analysons ce qui pourrait agir sur le choix d’une CSH lors de la dichotomie entre destinées myéloïde et lymphoïde.

Les différentes populations de précurseurs hématopoïétiques ont été isolées et leur capacité de différenciation a été étudiée en conditions clonales. Elles sont caractérisées par l’expression du marqueur CD4 et peuvent être subdivisées en sous populations qui expriment différentiellement RAG2. Nous démontrons que ces précurseurs peuvent se développer in situ et qu’ils représentent une partie des populations lymphoïdes observées dans la rate fœtale à partir du stade E16.

Nous analysons également la mise en place de l’architecture de la rate. Pour cela nous avons identifié phénotypiquement les populations de cellules inductrices des organes lymphoïdes secondaires. L’étude se poursuit actuellemment sur la fonction de ces cellules et leur interaction avec le stroma de la rate fœtale.

Nous nous tournons actuellement vers l’impact du microenvironnement stromal de la rate fœtale sur l’hématopoïèse et sa régionalisation ultérieure. Nous voulons développer une étude appliquée à un cas particulier de pathologie humaine. Nous allons analyser les interactions entre le stroma et les cellules hématopoïétiques lors du développement du syndrome myéloprolifératif de splénomégalie myéloïde. Nous allons appliquer nos résultats chez l’homme à des cas cliniques d’hématopathologies avec myélofibroses et métaplasie extramedullaire.

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dernière mise à jour : 16 décembre 2008