La Plate-forme de Cryomicroscopie Moléculaire [PFCM] est l'une des cinq plates-formes composant l'Imagopôle de l'Institut Pasteur (directeur : S. Shorte). Elle est rattachée au département de Biologie Structurale et Chimie (directeur : M. Véron). La Plate-forme de Cryomicroscopie Moléculaire réalise diverses prestations : des collaborations scientifiques, des activités de service , des activités de formation ainsi que la mise à disposition d'équipements notamment d'un cryomicroscope Jeol à canon à effet de champ.

Créée en Avril 2002, la Plate-forme de Cryomicroscopie Moléculaire a pour vocation de mettre en œuvre les techniques de la microscopie électronique moléculaire et de cryomicroscopie. La cryomicroscopie repose sur l'observation d'objets biologiques hydratés et congelés. Si elle est couplée à des techniques d'analyses d'images, elle permet d'obtenir des informations structurales à moyenne résolution (généralement entre 7 et 30 Å) et peut ainsi compléter d'autres approches de biologie structurale comme les rayons X et la RMN.

1-Collaborations et activités de service

Au cours de l'année 2005, nous nous sommes engagés dans deux projets de collaboration. Avec le laboratoire des Spirochètes (responsable: Isabelle de Saint Girons) nous avons étudié par cryomicroscopie et coloration négative de la protéine Scc, produit d'un gène codant pour une protéine coiled-coil de Spirochètes (K. Mazouni et al, 2006 " The Scc Spirochetal coiled-coil protein forms helix-like filaments and binds to nucleic acids generating nucleoprotein structures " J. Bacteriol, 188: pp. 469-476). Avec l'unité " Biologie Moléculaire du gène des extremophiles " (responsable : P. Forterre, équipe de D. Prangishvili) nous réalisons une étude structurale par cryomicroscopie du virus AFV qui infecte les Archae hyperthermophiles du genre Acidianus.

2-Mise à disposition d'équipements

En Décembre 2001, grâce à un cofinancement Institut Pasteur, CNRS, Région Ile de France, était implanté au sein de la plate-forme un microscope électronique Jeol de 200kV à canon à émission de champ, totalement équipé et dédié à la cryomicroscopie à haute résolution. L'implantation de ce cryomicroscope est née de la volonté d'un certain nombre de laboratoires français issus du GDR 2368 " cryomicroscopie structurale " de se doter d'un équipement de pointe. L'année 2002, a permis l'optimisation de cet instrument qui, à l'automne 2002, a été ouvert à l'ensemble de la communauté des laboratoires regroupés dans ce projet fédératif et plus généralement à l'ensemble de la communauté des cryomicroscopistes français. Ce microscope a été officiellement inauguré le 06 février 2003.

Au cours de l'année 2005 nous avons accueilli les équipes de :

F. Livolant, Laboratoire de Physique des Solides, UMR 8502, Université Paris-Sud http://www.lps.u-psud.fr/rubrique.php3?id_rubrique=9&lang=fr

E. Lecam, Institut Gustave Roussy, Villejuif http://www.igr.fr/php/index.php

J.L. Rigaud, Institut Curie, UMR168 http://www.curie.fr/recherche/themes/detail_equipe.cfm/lang/_fr/id_equipe/70.htm

Nous disposons également de deux scanners (Hi-Scan et Nikon 8000) qui permettent de digitaliser les négatifs et de préparer l'analyse d'images.

3- Activité d'enseignement

Au cours de l'année 2005 nous avons été amenés à participer à une action de formation  dans le cadre du cours de formation continue de microscopie électronique organisé par la Plate-forme de Microscopie Electronique.

Légendes des photos :

Figure 1 : La protéine Scc forme des structures polymériques in vitro (coloration négative, Philips CM12, barre : 1μm)

Figure 2 : Virus AFV1 observé en cryomicroscopie (Jeol 2010F, barre : 25 nm)

Mots-clés: microscopie électronique, cryomicroscopie, Scc, AFV1