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     Centre d'ingénierie génétique murine (Plate-forme)


  Responsable : Francina Langa Vives (francina@pasteur.fr)


  resume

 

Le Centre d'Ingénierie Génétique Murine (CIGM) est une nouvelle plate-forme technologique sur le campus qui vise à répondre aux besoins de la communauté scientifique de l'Institut Pasteur, autant qu'à des possibles clients extérieurs, intéressés par l'obtention de nouveaux modèles de souris modifiées génétiquement à partir de techniques de transgenèse classique ou bien par recombinaison homologue dans les cellules embryonnaires souches (ES).



  rapport

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Le Centre d'Ingénierie Génétique Murine (CIGM), attaché au Département de Biologie du Développement, a été créé officiellement en juin 2003. Le CIGM vise à la génération de nouveaux modèles de souris génétiquement modifiées à partir de techniques de transgenèse classique ou bien par recombinaison homologue dans les cellules embryonnaires souches, les cellules ES (transgenèse ciblée).

L'activité de transgenèse classique, consistant à la microinjection du gène d'intérêt dans le pronucléus des oocytes fertilisés, et qui avait été la principale activité du CIGM en 2003 s'est développée pendant l'année 2004, surtout quant à l'utilisation de fonds génétiques purs pour l'obtention des souris transgéniques. Nous avons entrepris 8 nouvelles collaborations avec des Unités de l'Institut Pasteur et aussi des laboratoires externes. Nous avons obtenu plus de 20 souris fondateurs (F0), dont 5 dans le fonds génétique pur C57BL/6, toutes ces souris étant en cours d'analyse chez nos partenaires.

La technique de transgenèse ciblée dans le locus endogène par recombinaison homologue dans les cellules ES, en sa première partie (electroporation, picage et sélection de clones recombinants) a démarré au CIGM en Novembre 2003. Nous avons obtenu des clones recombinants positifs en Janvier 2004. Après microinjection de ces cellules ES modifiées dans des blastocystes de souris, nous avons obtenu les premières souris chimères en mars 2004. L'étude de transmission à lignée germinale, accompli en juin 2004, a montré l'obtention de souris hétérozygotes pour la mutation désirée, et les premières souris homozygotes générées au CIGM ont été obtenues en septembre 2004.

Depuis, deux autres collaborations avec des Unités de l'Institut Pasteur ont aussi abouti à l'obtention de souris hétérozygotes. Deux nouvelles collaborations sont actuellement dans l'étape de microinjection des clones recombinants positifs et les trois dernières collaborations initiées en 2004 se trouvent dans la phase de l'analyse dans les laboratoires respectifs des clones sélectionnés. La microinjection des clones recombinants positifs trouvés sera une des principales activités du CIGM en 2005.

De plus, 4 nouveaux projets sont déjà évalués et dans la liste d'attente du CIGM pour 2005 (la construction des vecteurs de recombinaison homologue étant en cours dans les laboratoires respectifs).

Le CIGM exerce aussi une activité de conseil pour la réalisation des constructions géniques qui seront utilisées ultérieurement pour la transgenèse et/ou la recombinaison homologue afin de créer des nouveaux modèles in vivo dans différents domaines de la recherche fondamentale.

Mots-clés: souris, transgenèse, recombinaison homologue, cellules ES, microinjection



  publications

puce Toutes les publications 2004 sur notre base de données


  personnel

  Secrétariat Chercheurs Stagiaires Autre personnel
        LANGA VIVES, Francina

Responsable du Service, francina@pasteur.fr

BEAU, Rémi

Technicien sup., rbeau@pasteur.fr

GOMARD, Marie-Thérèse

Technicienne sup., mgoueyth@pasteur.fr

THOURON, Françoise

Technicienne qualifiée, fthouron@pasteur.fr


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