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Version PDF      Listeria


  Responsable : MARTIN Paul (listeria@pasteur.fr)


  resume

 

Le Laboratoire des Listeria héberge le Centre National de Référence des Listeria et le Centre Collaborateur de l'OMS pour la listériose d'origine alimentaire. Le CNR effectue la surveillance microbiologique, la détection des épidémies et participe aux investigations épidémiologiques de la listériose humaine en France. Il a coordonné en 2002 le volet microbiologique du projet européen sur la faisabilité d'une surveillance des infections à Listeria en Europe. Le CCOMS participe à la formation de stagiaires et caractérise les souches de L. monocytogenes adressées par des laboratoires étrangers. Le Laboratoire étudie l'expression de protéines de virulence dans des populations de souches de L. monocytogenes, et développe la technique de puces à ADN pour l'étude épidémiologique et le typage de cette bactérie.



  rapport

cale

Centre National de Référence des Listeria (CNR).

La listériose est une maladie grave survenant surtout chez les sujets dont le système immunitaire est perturbé : femmes enceintes et nouveau-nés, personnes âgées et sujets immunodéprimés, personnes atteintes de cancers, de cirrhoses, sous thérapie immunosuppressive, etc… Cette infection se traduit par des avortements ou la naissance d'un enfant infecté, des infections du système nerveux central ou des bactériémies/septicémies. Le diagnostic repose sur l'isolement de la bactérie à partir d'un site normalement stérile. Le CNR reçoit les souches isolées de cas cliniques et les caractérise avec des méthodes de typage phénotypique et moléculaire. Il participe à la déclaration obligatoire de la maladie (toute notification de cas au CNR étant transmise à l'Institut de Veille Sanitaire). Parallèlement, le CNR reçoit des souches isolées des aliments et de leur environnement, lors de contrôles effectués par les industries agroalimentaires, par les services de la Direction Générale de l'Alimentation ou par les services de la Direction Générale de la Concurrence, de la Consommation et de la Répression des Fraudes.

La surveillance régulière des données permet, pour les souches d'origine humaine : d'évaluer des tendances concernant le nombre total de cas, de détecter les cas groupés d'épidémie, de suivre l'évolution de la listériose dans les populations à risque, d'évaluer l'impact des mesures de prévention sur l'incidence, de surveiller la sensibilité des souches aux antibiotiques. La caractérisation des souches isolées des aliments ou de leur environnement permet d'analyser la distribution des souches et de disposer d'une banque de données permettant, dans certains cas, d'orienter les investigations pour identifier l'origine alimentaire de cas groupés.

Lors d'épidémies, le rôle du CNR est le suivant : (1) détection des cas groupés, (2) identification des cas épidémiques, et (3) participation à l'identification du véhicule alimentaire par comparaison des souches isolées des aliments avec les souches isolées des cas épidémiques.

Le CNR coordonne, avec l'InVS, le volet microbiologique du projet européen : " Feasability study for a collaborative surveillance of Listeria infections in Europe ".

Etat de la listériose humaine en 2001 selon les données du CNR (les données 2002 seront disponibles fin mars 2003).

En 2001, 185 cas sporadiques ont été recensés à partir des souches reçues au CNR. La répartition des formes cliniques a été la suivante : 41 (23%) formes materno-néonatales et 139 (77%) formes non materno-néonatales. Une diminution importante du nombre des formes périnatales a été observée entre 1994 et 1996, et depuis cette date le pourcentage de ces formes est stable. La distribution des formes non périnatales est la suivante : bactériémies/septicémies : 85 cas (61%) ; infections du système nerveux central : 44 cas (32%) et autres formes : 10 cas (7%), est comparable à celle des années antérieures. Entre 1996 et 2000, le nombre de cas de listériose a été compris entre 216 et 230 cas. L'année 2001 est caractérisée par une diminution significative des cas sporadiques de listériose, en comparaison avec les années précédentes. Cette baisse est à mettre en relation avec la prise en compte du risque Listeria par les professionnels de l'agroalimentaire et un meilleur respect des recommandations par les populations à risque.

Centre Collaborateur de l'OMS pour la listériose d'origine alimentaire (CCOMS).

Il participe à la formation de microbiologistes étrangers, à la surveillance de la listériose dans certains pays par le typage des souches, et collecte des informations sur la listériose dans plusieurs pays (incidence, caractéristiques épidémiologiques).

Recherche :

1) Etude de l'expression de la protéine de virulence InlA chez L. monocytogenes.

Certaines d'observations suggèrent que des souches présentes dans les aliments pourraient être moins fréquemment responsables d'infections chez l'homme : inégale répartition des sérovars, des ribovars, des profils d'isoenzymes ou des protéines de surface des souches selon leur origine humaine ou alimentaire, hétérogénéité de la virulence des souches sur modèles animaux ou cellulaires. Les travaux effectués par l'équipe de l'Unité des Interactions Bactéries-Cellules ont conduit à la mise en évidence des mécanismes moléculaires d'invasion de l'hôte par L. monocytogenes. Une étude de l'expression de plusieurs facteurs de virulence impliqués dans différentes étapes du cycle infectieux est réalisée en collaboration avec cette unité, afin de comparer les souches cliniques et les souches d'origine alimentaire. L'expression de la protéine InlA, nécessaire à l'entrée de la bactérie dans les cellules intestinales humaines, a été étudiée sur 300 souches de L. monocytogenes isolées de cas sporadiques humains et 150 souches isolées d'aliments. Un projet de publication est en cours de rédaction.

2) Epidémiologie génomique de L. monocytogenes.

A partir des résultats du séquençage partiel ou total des génomes de 3 souches de L. monocytogenes et d'une souche de L. innocua, une approche de génomique comparative a l'aide de filtres à haute densité (puces à ADN) a été entreprise, en utilisant dans un premier temps 470 gènes " spécifiques " de l'une ou l'autre des trois souches. L'ADN génomique de chaque souche a tester est alors hybridé séparément sur une membrane. Après acquisition, quantification et normalisation des signaux d'hybridation, l'étude comparative est réalisée sur la base de la présence ou de l'absence de chacun des 470 gènes testés.

Les résultats obtenus avec une centaine de souches d'origines et de caractéristiques différentes, provenant de la collection du Laboratoire des Listeria, montrent une parfaite différentiation des espèces de Listeria. De plus, L. monocytogenes se distribue en 5 groupes différents, à l'intérieur desquels se délimitent plusieurs sous-groupes. Toutes les souches testées appartenant au même sérovar se regroupent dans un même cluster, lequel peut regrouper des souches de plusieurs sérovars. Le criblage des gènes d'intérêt potentiellement impliqués dans la biodiversité, ainsi que les résultats de la séquence complète d'une souche de sérotype 4b, permettront la conception d'une nouvelle membrane plus informative. Cette nouvelle membrane sera testée sur l'ensemble des souches humaines isolées pendant l'année 2000 de cas sporadiques de listériose en France.

3) Recherche de souches de virulence atténuée dans les populations naturelles de L. monocytogenes.

Ce programme, réalisé en collaboration avec plusieurs autres équipes (Institut Pasteur, INRA, Industriels privés), a permis de décrire l'existence, peu fréquente, de souches de virulence atténuée dans les populations de L. monocytogenes issues de l'industrie agroalimentaire (élevage, transformation), et de commencer à caractériser ces mutants naturels à l'échelle moléculaire.

Mots-clés: listériose, surveillance, Listeria, biodiversité



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  personnel

  Secrétariat Chercheurs Stagiaires Autre personnel
  Zoulica LEBRI , listeria@pasteur.fr Paul MARTIN

Christine JACQUET

Michel DOUMITH (chercheur temporaire)

Marina MACEDO VINAS (chercheur temporaire)

Loubna HAJOUI (chercheur temporaire)

  Laeticia BELLON

Evelyne FILIATRE

Elodie PINET

Stéphanie DEMAIL

Zina SOUANEF


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