Institut Pasteur Rapport d'activité de l'unité Biologie du developpement

CNRS URA 1960


Responsable : BABINET CHARLES (chbabi@pasteur.fr)

Résumé du rapport

Notre laboratoire s'intéresse au développement embryonnaire de la souris. Trois thèmes sont abordés : 1) Le rôle des interactions nucléocytoplasmiques dans le développement préimplantatoire. 2) L'analyse de la fonction de certains gènes par recombinaison homologue dans les cellules souches embryonnaires. 3) La recherche de gènes de développement grâce à la stratégie de piégeage de gènes.

Abstract

Our laboratory is studying the mouse embryonic development. Three lines of research are conducted : 1) We are pursuing the positional cloning of a lethal mutation , Ovum mutant (Om), which induces death around the blastocyst stage and the expression of which depends on a parental effect. 2) We develop a strategy of gene trapping to identify developmentally important genes. 3) We study the function of different genes in development via gene targeting approaches. We focus in particular on genes coding for cytoskeletal intermediate filament proteins.

Texte du rapport

Clonage de la mutation Ovum mutant, entraînant la mort embryonnaire au stade blastocyste et dont l'expression dépend d'un effet parental (P. Baldacci, M. Cohen-Tannoudji)

La lignée DDK est porteuse d'une mutation létale conditionnelle, Ovum mutant, qui entraîne la mort des embryons au stade blastocyste et dépend d'un effet parental. Nous avons maintenant établi un contig de la région contenant le locus Om à l'aide de chromosomes artificiels de levure et de bactéries. Les techniques de piégeage d'exons et d'hybridation/sélection de cDNA nous a permis d'identifier différentes séquences géniques. Enfin, pour tenter de rétrécir la région génétique d'intérêt, nous développons une approche de complémentation par transgénèse.

Analyse de la fonction des gènes codant pour des protéines de filaments intermédiaires par mutagénèse in vivo (E. Colucci-Guyon, F. Langa Vives)

Pour analyser la fonction des protéines de filaments intermédiaires, nous avons créé, par recombinaison homologue dans les cellules ES, des mutations nulles dans des gènes de la desmine et de la vimentine. Les souris, dépourvues de desmine ou de vimentine sont viables et fertiles. Cependant les souris dépourvues de vimentine présentent un défaut cérébelleux lié à des anomalies de la glie de Bergman et des cellules de Purkinje (collaboration A. Privat, Montpellier). De plus elles présentent une diminution pondérale importante. Nous avons également démontré chez ces souris que l’absence de vimentine entraîne des anomalies dans la formation du réseau de nestine, une protéine de filament intermédiaire spécifique des souris souches musculaires et nerveuses. Les souris dépourvues de desmine présentent des anomalies des trois types de muscles squelettique, lisse et cardiaque (collaboration D. Paulin, Institut Pasteur).

Recherche de gènes du développement par "piégeage" de gènes (J. Barra)

Cette approche a pour but la création de mutations dans des gènes actifs au cours du développement de l'embryon de souris, en vue de leur caractérisation. Ces mutations sont obtenues par l'insertion, dans le génome de la souris, d'un vecteur qui comprend un gène rapporteur (qui code la beta-galactosidase), dépourvu de promoteur et de séquences régulatrices. Ce rapporteur ne s'exprime donc que s'il est inséré en phase dans un gène actif. Nous avons récemment cloné les séquences flanquantes de trois de ces insertions et identifié les gènes correspondants. L'analyse de l'expression de ces gènes au cours du développement ainsi que de l'effet de la mutation d'insertion est en cours.

Activité de service
(V. Guyot)

L'unité a la responsabilité d'un service pour la création de souris transgéniques.

Personnel de l'unité

Chercheurs de l'unité

BABINET Charles, CNRS et IP, chbabi@pasteur.fr BALDACCI Patricia, IP, baldacci@pasteur.fr BARRA Jacqueline, IP, barraja@pasteur.fr COHEN-TANNOUDJI Michel, CNRS, m-cohen@pasteur.fr COLUCCI-GUYON Emma, IP, emmaco@pasteur.fr

Stagiaires de l'unité

LANGA VIVES Francina, Post-doc
LE BRAS Stéphanie, Doctorant, slebras@pasteur.fr RALLU Murielle, Post-doc

Autre personnel de l'unité

GUYOT Valérie, IP, vguyot@pasteur.fr
KRESS Chantal, CNRS, kerssova@pasteur.fr MESBAH Karim, IP, mesbahk@pasteur.fr
VANDORMAEL-POURNIN Sandrine, IP, drinette@pasteur.fr

Publications de l'unité

98290727
99099244
99059736
99025545
98442060
98350121
98147784

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