FACSAria III
Le FACSAria III est un trieur avec ‘flow cell’ ou cuvette fermée couplée par gel à un bloc optique de focalisation sur 4 pinholes qui permet de détecter des fluorescences avec une sensibilité élevée (similaire à un objectif à immersion par rapport à un objectif à sec. La sensibilité est ~ ½ décade de plus que par rapport au système de tri ‘jet in air’)
Il peut trier jusqu’à 70 000 évènements/sec
Il n’est pas nécessaire d’effectuer d’alignement optique et le maintien du ‘Drop Delay’ est automatique
Il est piloté par le logiciel FACSDiVa
Il est possible de trier :
- de 1 à 4 populations simultanément
- dans des eppendorfs, des tubes de 1-15 ml, sur plaques 6-384 puits, sur lame
- dans des conditions de température contrôlée ( 4°C – 42°C) grâce à un système Peltier et à un couplage avec un bain-marie (Haake)
- à diverses pressions (5 à 75 psi) et avec quatre tailles de buses différentes (70, 85, 100 et 130 mm) pour trier des cellules fragiles et/ou de grande taille
- des pathogènes de niveau 2 grâce à un sytème de filtration des particules ‘Whisper Aerosol Evacuation System’ et une enceinte de protection de type PSM (Oxygen)
L’appareil est relié à une imprimante couleur réseau
|
Laser |
PMT |
LP Mirror |
BP Filter |
Fluorochromes |
|
Near UV* |
A |
502 |
510/50 |
AmCyan, V500 |
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375/405 nm (Octagon) |
B |
- |
450/40 |
DAPI, Pac Blue, V450 |
|
Violet* |
A |
750 |
800/30 |
Qdot 800 |
|
375/405 nm (Octagon) |
B |
685 |
710/50 |
Qdot 700 |
|
|
C |
640 |
670/30 |
Qdot 655 |
|
|
D |
600 |
610/20 |
Qdot 605 |
|
|
E |
502 |
510/50 |
AmCyan, V500 |
|
|
F |
- |
450/40 |
DAPI, Indo-1 (violet), Pac Blue, CFP |
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Blue |
A |
655 |
695/40 |
PerCP, PerCP-Cy5.5 |
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488 nm (Trigon) |
B |
502 |
530/30 |
FITC, GFP, Alexa Fluor 488, Yoyo-1 |
|
|
C |
- |
488/10 |
SSC |
|
Yellow/Green |
A |
735 |
780/60 |
PE-Cy7 |
|
561 nm (Octagon) |
B |
685 |
710/50 |
PE-Cy5.5 |
|
|
C |
630 |
670/14 |
PE-Cy5, 7AAD |
|
|
D |
600 |
610/20 |
PI, mCherry, Tomato, RFP, PE-TxRed |
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|
E |
570 |
586/15 |
PE, Cy3 |
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Red |
A |
755 |
780/60 |
APC-Cy7 |
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633 nm (Trigon) |
B |
690 |
730/45 |
AlexaFluor 700 |
|
|
C |
- |
660/20 |
APC |
* Vous pouvez choisir le Proche UV ou le Violet mais vous ne pouvez pas utiliser les deux lasers en même temps. Le Violet est le laser par défaut. Si vous utilisez le Proche UV, les filtres surlignés en jaune ainsi que la configuration dans Diva doivent être changés