ImageStream

L’ImageStream dispose de 3 lasers à puissance variable :

• Laser solide bleu 488 nm (20-200 mW)
• Laser violet 405 nm (350 mW)
• Laser rouge 658 nm (90 mW)

Un module EDF (Extended Depth of Field) permet de prendre une image avec un focus optimal de la cellule entière. Les applications possibles sont : FISH spot counting, co-localisation…

Préparation des échantillons

• En général, il est possible d’utiliser directement le même type de protocole de marquage que celui utilisé en cytométrie en flux classique (effectuer le marquage en présence d’azide de préférence pour éviter le capping des anticorps)
• Concentration recommandée : 5 x 10⁷ cellules/ml dans au moins 50 ml de solution dans un eppendorfs de 0,5 ml en polypropylène siliconé (si possible)
• Avant le passage des échantillons, filtrer avec un tamis cellulaire de 40 mm
• Choix des fluorochromes :

Les Fluorochromes indiqués en noir sont excités par le laser 488, en bleu(*) par le laser 405 et en rouge(**) par le laser 658.