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ImageStream

ImageStream


L’ImageStream dispose de 3 lasers à puissance variable :

  • Laser solide bleu 488 nm (20-200 mW)
  • Laser violet 405 nm (350 mW)
  • Laser rouge 658 nm (90 mW)

 

Un module EDF (Extended Depth of Field) permet de prendre une image avec un focus optimal de la cellule entière. Les applications possibles sont : FISH spot counting, co-localisation…

 

Préparation des échantillons

  • En général, il est possible d’utiliser directement le même type de protocole de marquage que celui utilisé en cytométrie en flux classique (effectuer le marquage en présence d’azide de préférence pour éviter le capping des anticorps)
  • Concentration recommandée : 5 x 107 cellules/ml dans au moins 50 ml de solution dans un eppendorfs de 0,5 ml en polypropylène siliconé (si possible)
  • Avant le passage des échantillons, filtrer avec un tamis cellulaire de 40 mm
  • Choix des fluorochromes :

Les Fluorochromes indiqués en noir sont excités par le laser 488, en bleu(*) par le laser 405 et en rouge(**) par le laser 658.

 

Channel 1

Channel 2

Channel 3

Channel 4

Channel 5

Channel 6

470-500nm

400-470nm

500-560nm

560-595nm

595-660nm

660-735nm

Darkfield

Brightfield

Brightfield

Brightfield

Brightfield

Brightfield

 

DAPI*

Fluorescein

PE

7-AAD

PE-Cy5

 

Hoechst*

AlexaFluor 488

Cy-3

Alexa610/PE

PE-Cy5.5

 

Pacific Blue*

GFP

AlexaFluor 546

Propidium Iodide

Alexa680/PE

 

Cascade Blue*

Syto Green

AlexaFluor 555

PE -TexasRed

Alexa647/PE

 

Marina Blue*

Spectrum Green

DSRed

ECD

PerCP

 

AF 430*

YFP

 

 

PerCP-Cy5.5

 

AF 405*

Sybr Green

 

 

Draq-5

 

 

Pacific Orange*

 

 

QD-705

 

 

 

 

 

APC**

 

 

 

 

 

AF680**

 

 

 

 

 

AF647**

 

 

 

 

 

Cy5**

 

 

 

 

 

Cy5.5**